答案是：答 (1)材料和提取瓶充分干燥。(2)材料尽可能的不损失。(3)提取充分完全。(4)提取后瓶子还要充分的干燥。

答案是：答 纸层析是分配层析,利用分配系数不同,即氨基酸在两相中的溶解能力不同。离子交换层析利用氨基酸是两性物 质,在一定pH下不同氨基酸带电性质和带电量不同,因此交换能力不同。 纸层析步骤:滤纸准备、样品处理、点样、 平衡、展开、显色和定性定量分析。柱层析步骤:固定相准备、装柱、上柱、洗脱和收集、定性定量分析。 试述凝 胶层析原理,说明凝胶层析的应用并列出常用凝胶名称(10分)。 凝胶层析柱装有多孔凝胶,当含有各组分的混合液流 经凝胶层析柱时,各组分在层析柱内同时进行两种不同的运动。一种是随着溶液流动而进行的垂直向下的移动,另一 种是无定向的分子扩散运动。大分子物质由于分子直径大,不能进入凝胶微孔,只能分布于凝胶颗粒的间歇中以较快 速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶微孔,不断进出一个个颗粒的微孔内外,因此流动速度较慢,从而使混合溶 液中各组分按照相对分子量由大到小顺序先后流出层析柱得到分离。 应用:不同分子量蛋白质分离、蛋白质分子量 测定、蛋白质脱盐等。 常用凝胶:葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶。

答案是：答 样品应点在负极端,因为电泳缓冲液PH=8.3,在这样的环境中,血清蛋白的几种蛋白质电离后都带上负电荷,所以只 有点样在负极端,外加电压后,才能向正极移动,彼此才能分开。

答案是：答 (1)用定糖法检测。(2)用紫外分光光度计检测。(3)用琼脂糖凝胶电泳检测。等

答案是：答 (1)琼脂含液体量 大,可达98-99%,近似自由电泳,但是样品的扩散度比自由电泳小,对蛋白质的吸附 极微。(2)琼脂作 为支持体有均匀,区带整齐,分辨率高,重复性好等优点。(3) 电泳速度快。(4)透明而不吸收紫外线,可以直接用紫外检 测仪作定量测定。(5) 区带易染色,样品易回收,有利于制止备。然而琼脂中有较多硫酸根,电渗作用大。 琼脂糖是从 琼脂中提取出来的,是由半乳糖和3.6-脱水-L- 半乳糖相互结合的链状多 糖。含硫酸根比琼脂少,因而分离效果明显提 高。 琼脂(糖)电泳常用缓冲液的pH在6-9之间,离子强度为0.02-0.05。离子强度过 高时,会有大量电流通过凝胶,因而产 生热量,使凝胶的水份量蒸发,析出盐的结 晶,甚至可使凝胶断裂,电流中断。常用的缓冲液有硼酸盐缓冲液与巴比妥 缓冲液。 为了防止电泳时两极缓冲液槽内pH和离子强度的改变,可在每次电泳后合并两极槽内 的缓冲液,混匀后再 用。

答案是：一种利用带孔凝胶珠作基质,按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。凝胶过滤层析具有分子筛效 应。

答案是：亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种 可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。

答案是：离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离 子型化合物的一种方法。

答案是：电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核 酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所 带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分 子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

答案是：凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。分子量大 小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小“排队,凝胶表现分子筛效应。

答案是：代表酶制剂的纯度。根据国际酶学委员会规定比活力用每毫克蛋白所含的酶活力单位数表示。

答案是：是指在特定条件下(25℃、最适的pH值和底物浓度),每分钟可催化1微摩尔(10-6摩尔)底物转化所需要的酶量。

答案是：用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,使混合物各组分以不同速度移动,从 而达到分离的一种物理方法。

答案是：带电粒子在直流电场中向着 所带电性相反的电极移动的现象。

答案是：盐析:在蛋白质溶液中加入一定量的高浓度中性盐(如硫酸氨),使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。盐 溶:加入少量中性盐可增加蛋白质的溶解度,即盐溶现象。