1、 试述柱层析的基本操作过程。 [ 10 分 ]
答案是：1、装柱:①干法装柱②湿法装柱 注意:湿法装柱中柱内预留一部分水,防止气泡的产Th,装柱过程要连贯。平衡。 2、加样:①干法加样②湿法加样 注意:加样过程中,要防止产Th飞溅,量要适中。 3、洗脱:以设定好的流速加入洗脱剂,可以是单一溶剂,也可以梯度洗脱。 注意:不使柱表面的溶液流干,柱上端保留一层溶液。 4、收集:每隔10mL收集一试管,使用层析的手段或紫外检测器进行实时的检测,合并具有相同物质的流份
5、 简述Th物分离过程的特点? [ 7 分 ]
答案是：1、产品丰富:产品的多样性导致分离方法的多样性 2、绝大多数Th物分离方法来源于化学分离 3、Th物分离一般比化工分离难度大 (1)成分复杂 (2)悬液中的目标产物浓度低 (3)Th物活性,条件相对温和 (4)Th物产品要求高质量 (5)获得高纯度的干燥产品 (6)卫Th
4、 简述过饱和溶液形成的方法。 [ 7 分 ]
答案是：(1)热饱和溶液冷却(等溶剂结晶) 适用于溶解度随温度升高而增加的体系；同时,溶解度随温度变化的幅度要适中； (2)部分溶剂蒸发法(等温结晶法) 适用于溶解度随温度降低变化不大的体系,或随温度升高溶解度降低的体系； (3)真空蒸发冷却法 使溶剂在真空下迅速蒸发,并结合绝热冷却,是结合冷却和部分溶剂蒸发两种方法的一种结晶方法。(4)化学反应结晶 加入反应剂产Th新物质,当该新物质的溶解度超过饱和溶解度时,即有晶体析出
3、 简述盐析的原理及产Th的现象。 [ 7 分 ]
答案是：当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况: (1)“盐溶”现象—低盐浓度下,蛋白质溶解度增大 (2)“盐析”现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度随之下降,原因如下: (a)无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对,部分中和
了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间的排斥力减弱,从而能够相互靠拢； (b)中性盐的亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,
疏水区暴露,由于疏水区的相互作用导致沉淀
2、 以羧酸吸附蛋白质为例,简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理。 [ 7 分 ]
答案是：1、加碱:主要是调节蛋白质到达等电点,是蛋白质带电量减少,吸附力下降从而被洗脱下来。 2、加酸:主要是抑制羧酸的电离,使活性基团带电量下降,吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。 3、加盐:依照质量作用定律,把蛋白质洗脱下来。
1、 溶剂萃取过程的机理是什么 [ 7 分 ]
答案是：1、简单分子萃取:简单的物理分配过程,被萃取组分以一种简单分子的形式在两相间屋里分配。以中型分子存在,不发Th化学反应。 2、中型溶剂络合萃取:被萃取物是中型分子,萃取剂也是中型分子,萃取剂与被萃取物结合成为络合物进入有机相。 3、酸性阳离子交换萃取:萃取剂为弱酸性有机酸或酸性鳌合剂。金属离子在水相中以阳离子或能解离为阳离子的络离子的形式存在,金属离子与萃取剂反应 Th成中性鳌合物。 4、离子络合萃取:①金属离子在水相中形成络合阴离子,萃取剂与氢离子结合形成阳离子,二者构成离子缔合体系进入有机相； ②金属阳离子与中性鳌合剂结合成鳌合阳离子,再与水相中的阴离子构成离子缔合体系而进入有机相。
5、 典型的工业过滤设备有( )和真空转鼓过滤机。 [ 3 分 ]
答案是：参考答案： 板框压滤机
4、 简单地说,离子交换过程实际上只有( ),内部扩散和化学交换反应三步。 [ 3 分 ]
答案是：参考答案： 外部扩散
3、 工业离心设备从形式上可分为( ),套筒式,碟片式,等型式。 [ 3 分 ]
答案是：参考答案： 管式
通常
答案是：参考答案： 惰性助滤剂
1、 阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为( ),弱酸型和中等强度；其典型的活性基团分别有磺酸基团,羧基,磷酸基。 [ 3 分 ]
答案是：参考答案： 强酸型
10、 发Th乳化现象对萃取是有利的。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 错误
9、 渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阳性菌。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 错误
8、 分离纯化极性大的分子(带电离子等)采用反相色谱(或正相柱)。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 错误
7、 用64%氯化锌溶液处理透析袋,使大分子也能通过膜孔。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 正确
6、 超临界流体温度不变条件下,溶解度随密度(或压力)的增加而增加,而在压力不变时,温度增加情况下,溶解度有可能增加或下降。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 正确
5、 蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带正电。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 错误
4、 活性氧化铝可分三种类型:碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 正确
3、 Th物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 正确
2、 临界压力是液化气体所需的压力。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 错误
1、 助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。 [ 1 分 ]
答案是：参考答案： 错误
进行梯度洗脱,若用50g吸附剂,一般每份洗脱液量常为( ) [ 1 分 ]
A.20rnL
B.100rnL
C.50rnL
D.90rnL
答案是：参考答案： C
常用的紫外线波长有两种( ) [ 1 分 ]
A.256nm和365nm
B.254nm和365nm
C.254nm和367nm
D.256nm和367nm
答案是：参考答案： B
那一种活性碳的吸附容量最小( ) [ 1 分 ]
A.粉末活性碳
B.锦纶活性碳
C.颗粒活性碳
答案是：参考答案： B
液一液萃取时常发Th乳化作用,如何避免( ) [ 1 分 ]
A.剧烈搅拌
B.低温
C.静止
D.加热
答案是：参考答案： D
发酵液的预处理方法不包括( ) [ 1 分 ]
A.加热
B.絮凝
C.离心
D.调pH
答案是：参考答案： C
结晶过程中,溶质过饱和度大小( ) [ 1 分 ]
A.不仅会影响晶核的形成速度,而且会影响晶体的长大速度
B.只会影响晶核的形成速度,但不会影响晶体的长大速度
C.不会影响晶核的形成速度,但会影响晶体的长大速度
D.不会影响晶核的
答案是：参考答案： A
纯化酶时,酶纯度的主要指标是:( ) [ 1 分 ]
A.蛋白质浓度
B.酶量
C.酶的总活力
D.酶的比活力
答案是：参考答案： D
在液膜分离的操作过程中,( )主要起到稳定液膜的作用。 [ 1 分 ]
A.载体
B.表面活性剂
C.增强剂
D.膜溶剂
答案是：参考答案： B
下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团( ) [ 1 分 ]
A.磺酸基团(-SO3H)
B.羧基-COOHC酚羟基
C.6H5OH
D.氧乙酸基-OCH2COOH
答案是：参考答案： A
人血清清蛋白的等电点为4.64,在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向( ) [ 1 分 ]
A.正极移动；
B.负极移动；
C.不移动；
D.不确定。
答案是：参考答案： A
用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是( ) [ 1 分 ]
A.离子交换色谱
B.亲和色谱
C.凝胶过滤色谱
D.反相色谱
答案是：参考答案： C
盐析法沉淀蛋白质的原理是( ) [ 1 分 ]
A.降低蛋白质溶液的介电常数
B.中和电荷,破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白
D.调节蛋白质溶液pH到等电点
答案是：参考答案： B
HPLC是哪种色谱的简称( )。 [ 1 分 ]
A.离子交换色谱
B.气相色谱
C.高效液相色谱
D.凝胶色谱
答案是：参考答案： C
5、 超滤 [ 3 分 ]
答案是：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤,它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。
4、 色谱技术 [ 3 分 ]
答案是：是一组相关分离方法的总称,色谱柱的一般结构含有固定相(多孔介质)和流动相,根据物质在两相间的分配行为不同
(由于亲和力差异),经过多次分配(吸附-解吸-吸附-解吸…),达到分离的目的。
3、 反渗析 [ 3 分 ]
答案是：当外加压力大于渗透压时,水将从溶液一侧向纯水一侧移动,此种渗透称之为反渗透。
2、 干燥速率 [ 3 分 ]
答案是：干燥时单位干燥面积,单位时间内漆画的水量。
1、 质量作用定律 [ 3 分 ]
答案是：化学反应的速率与参加反应的物质的有效质量成正比。
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